Colistina ELISA Test Kit Alta Reproducibilidade Alta Sensibilidade

Certifique-se de que as amostras estão devidamente armazenadas.

As amostras congeladas podem ser descongeladas a temperatura ambiente (20 ‡ 25 °C).- Não.C / 68 ¢ 77- Não.F) ou numa geladeira antes de ser utilizado.

1Preparação de 1X colistina extração tampão I:

Misture 1 volume de 10X Colistin Extraction Buffer I com 9 volumes de água destilada.

2.Preparação de 1X colistina extração tampão II para extração de carneMisturar 1 volume de 6X Colistin Extraction Buffer II com 5 volumes de água destilada.

3Preparação de 3X Colistin Extraction Buffer II para extração de rações e camarõesMisture 3 volumes de 6X Colistin Extraction Buffer II com 3 volumes de água destilada.

Carnes(carne de bovino, de porco e de frango)

1. Remover a gordura da carne, homogeneizar uma quantidade razoável de amostra com um misturador adequado.

2Pesar 1 g da amostra de carne homogeneizada, adicionar 3,5 ml de colistina 1X extração tampão I e 500 ml de colistina 1X extração tampão II, adicionar 3 ml de vórtice de n-hexano ou agitar durante 3 minutos.

3Centrifugar durante 10 minutos a 4.000 x g a temperatura ambiente (20 ¢ 25- Não.C / 68 ¢ 77- Não.F) 4. Aspirar e eliminar a camada de n-hexano, depois transferir 500 I.L. de supernatante para um novo tubo contendo 200 I.L. de tampão de extracção de colistina 10X.200 I.L. de etanol 100% e 100 I.L. de colistina Balance Buffer.

5Vortex ou agitação durante 30 segundos a velocidade máxima.

6Utilize 75 IU por poço no ensaio ELISA.

Nota: Fator de diluição:10 Pó de carne

1Homogeneizar uma quantidade razoável de amostra com um misturador adequado.

2Pesar 0,5 g da amostra homogeneizada, adicionar 3,5 ml de colistina 1X extração tampão I e 500 ml de colistina 1X extração tampão II, adicionar 3 ml de vórtice de n-hexano ou agitar durante 3 minutos.- Não.Preparação da amostra

N3Centrifugar durante 10 minutos a 4.000 x g a temperatura ambiente (20 ¢ 25- Não.C / 68 ¢ 77- Não.F).

4Aspirar e descartar a camada de n-hexano, transferir 500 I.U. de supernatante para um novo tubo contendo 200 I.U. de 10 X Colistin Extraction Buffer,200 I.L. de etanol 100% e 100 I.L. de colistina Balance Buffer.

5Vortex ou agitação durante 30 segundos a velocidade máxima.

6Utilize 75 IU por poço no ensaio ELISA.

Nota: Fator de diluição: 16.

1Homogeneizar uma quantidade razoável de amostra com um misturador adequado.

2Pesar 0,5 g da amostra homogeneizada, adicionar 2 ml de 0,1 M HCl e 2 ml de n-hexano e misturar por vórtice a alta velocidade durante 3 minutos.

3Centrifugar durante 10 minutos a 4.000 x g a temperatura ambiente (20 ¢ 25- Não.C / 68 ¢ 77- Não.F). 4. Aspirar e descartar a camada de n-hexano, em seguida, transferir 200uL de supernatante para um tubo centrífugo limpo, adicionar 150uL de 1×Colistin Extraction Buffer I, e agitar a alta velocidade durante 30 segundos.

5Utilize 75 IU por poço no ensaio ELISA.

Nota: Fator de diluição:8.75 Peixes/Camarões

1Homogeneizar uma quantidade razoável de amostra com um misturador adequado.

2Pesar 1,0 g da amostra de carne homogeneizada, adicionar 3,5 ml de colistina 1X extração tampão I e 500 ml de colistina 3X extração tampão II, adicionar 3 ml de vórtice de n-hexano ou agitar durante 3 minutos.

3Centrifugar durante 10 minutos a 4.000 x g a temperatura ambiente (20 ¢ 25- Não.C / 68 ¢ 77- Não.F) 4. Aspirar e eliminar a camada de n-hexano, depois transferir 200 I.L. de supernatante para um novo tubo contendo 300 I.L. de água destilada, 200 I.L. de 10 X Colistin Extraction Buffer,200 I.L. de etanol 100% e 100 I.L. de colistina Balance Buffer.

5Vortex ou agitação durante 30 segundos a velocidade máxima.

6Utilize 75 IU por poço no ensaio ELISA.

Nota: Fator de diluição:25